2020年10月26日 星期一

慢性痛覺敏化

       常常有許多婦女做些家事、工作,就腰痠背痛,全身不舒服,去醫院看病、驗血、X光檢查卻正常,因而常被誤解為「公主病」。醫師提醒,這可能是纖維肌痛症(Fibromyalgia),其原因不明,慢性疼痛、疲勞、失眠是主要症狀,須對症下藥,才能解決問題。
                      圖1. 纖維肌痛症(FM) : 一種放大的疼痛反應 (資料來自: 參考文獻1)
        有害刺激可以使神經系統對隨後的刺激作出反應。右側曲線表示正常的疼痛反應與刺激強度的關係,即使強烈的刺激也不會引起疼痛。但是,外傷會導致曲線向左移動。然後,有害刺激變得更加疼痛(痛覺過敏(hyperalgesia)),通常無痛刺激會伴隨疼痛(異常性疼痛(allodynia))。
allodynia (痛覺超敏)觸摸痛 - 輕輕碰到也會感覺到疼痛。
hyperalgesia (痛覺過敏)痛覺敏感 - 比較輕的痛覺刺激卻會感覺非常明顯疼痛。
                               圖2. 纖維肌痛症的9個可能成因 (資料來自: 參考文獻2)
        纖維肌痛症的病人由於神經傳導物質的失衡,導致神經系統過度放電,使得痛覺被異常放大。其他如家族遺傳、睡眠障礙、身體與心理壓力等因素也可能增加纖維肌痛症發生。
                     圖3. 痠痛是怎麼一回事?酸的致痛與止痛訊息 (資料來自: 參考文獻3)
        當肌肉酸化時,酸可激活俱有ASIC3 或TRPV1的痛覺神經,造成疼痛過敏化與神經可塑性變化;同時亦激活俱有“酸止痛”能力的神經釋放物質P,以抑制疼痛。
        神經可塑性改變包括神經營養因子(例如BDNF)水平降低,樹突萎縮,神經發生和突觸形成減少以及神經膠質細胞功能障礙。神經可塑性受損進一步導致神經化學失衡。
                     圖4. 骨骼肌間質pH降低和細胞葡萄糖代謝受損 (資料來自: 參考文獻4)
        過多的葡萄糖/肝糖利用率和有氧代謝障礙會導致通過糖酵解途徑產生乳酸。此外,隨著組織液中pH的降低,胰島素與其受體的結合親和力降低。這導致經由葡萄糖轉運蛋白4(GLUT4)抑制胰島素信號傳導活性和葡萄糖攝取。
        因此,低的組織液pH值會降低骨骼肌細胞中胰島素對其受體的親和力,從而導致胰島素阻抗和高血糖症。IR,胰島素受體;IRS,胰島素受體受質;PI3K,磷酸肌醇-3-激酶;AS160,160 kDa的Akt受質;MCT,單羧酸鹽轉運蛋白;NHE,Na + / H+交換子。
                          圖5. 中樞神經系統神經遞質影響疼痛 (資料來自: 參考文獻5)
        通常促進(左側)或抑制(右側)中樞神經系統(CNS)疼痛傳遞的神經遞質系統。 箭頭表示患有纖維肌痛(FM)的個體的中樞神經系統中這些神經遞質的水平,方框表示已證明對FM有效,可能部分通過這些神經遞質起作用的藥物。
  圖6. 反覆和間歇性噪音壓力(RISS)誘導的慢性痛覺敏化機制示意圖 (資料來自: 參考文獻6)
        研究證實長期壓力將造成身體慢性疼痛。RISS會引起過度的氧化應激和脂質氧化,從而導致通過血小板活化因子乙醯水解酶(PAF-AH)催化或ox-PCs自發脫醯,而產生溶血磷脂醯膽鹼(LPC)16:0。
        因此,LPC16:0通過激活肌肉組織中的酸敏感離子通道3(ASIC3)引起傷害性反應,並引起慢性痛覺過敏。通過減少LPC生成,PAF-AH抑制劑可能因此在與壓力有關的疼痛疾病(如纖維肌痛)中有益。
                                  圖7. 睡眠三原力相互作用 (資料來自: 參考文獻7)
生活習慣的重要性
        代謝症候群即是生活習慣病,可經由(1)均衡飲食、(2)規律運動及(3)改善習慣來增進身體健康。
        隨著時代的演變,生活習慣改變而身體無法適應,讓以往可能在中老年人身上出現的疾病,也出現在年輕人身上。
        而晝夜節律 --睡眠 -- 壓力 三者息息相關。
        一個人的晝夜節律被打亂時,它與長期的負面健康結果相關,包括肥胖。


參考文獻:
1. Gottschalk A and Smith DS. 2001; Am Fam Physician. 63:1979-1986.
2. 纖維肌痛症是怎麼造成的。台灣纖維肌痛症顧問委員會共同編著(纖維肌痛症衛教網)
https://www.pfizer.com.tw/mediacalinfo/2010/27/page03.html
3. 陳志成。【專欄】痠痛是怎麼一回事?。漫步科研, 生命科學, 科普專欄。中研院訊網頁(2018年9月27日)
https://newsletter.sinica.edu.tw/%E7%97%A0%E7%97%9B%E6%98%AF%E6%80%8E%E9%BA%BC%E4%B8%80%E5%9B%9E%E4%BA%8B%EF%BC%9F/ https://jbiomedsci.biomedcentral.com/articles/10.1186/s12929-018-0486-5
4. Aoi, W., Zou, X., Xiao, J., & Marunaka, Y. (2019). Body Fluid pH Balance in Metabolic Health and Possible Benefits of Dietary Alkaline Foods. https://www.atlantis-press.com/journals/efood/125918568/view
5. Harte, Steven E.; Harris, Richard E.; Clauw, Daniel J. (2018). "The neurobiology of central sensitization." Journal of Applied Biobehavioral Research 23(2): n/a-n/a.
6. Hung CH, Lee CH, Tsai MH, Chen CH, Lin HF, Hsu CY, Lai CL, Chen CC. Activation of acid-sensing ion channel 3 by lysophosphatidylcholine 16:0 mediates psychological stress-induced fibromyalgia-like pain. Ann Rheum Dis. 2020 Sep 9:annrheumdis-2020-218329. doi: 10.1136/annrheumdis-2020-218329. Epub ahead of print. PMID: 32907805.
7. 吳奇霖。失眠與睡眠 – 我們為什麼會想睡覺?2018年5月5日。 https://www.careonline.com.tw/2018/05/sleep.html?fbclid=IwAR0Y9fbJsfLuwSMxi6prGgrwdbTUUJDrGeZo8FtFviuqr_O1Hk_ZKYk6wl8



調整飲食對阿爾茨海默症(AD)的關鍵

         圖 通過飲食調整對阿爾茨海默症(AD)進行非藥物治療

        阿茨海默症(AD)是癡呆症最常見的形式,佔所有病例的70%以上。
        來自動物研究,流行病學研究和臨床試驗的大量證據,將對地中海飲食(MedDi)的較高依從性與降低的認知下降和癡呆症風險聯繫起來。
        飲食療法的非藥物治療模式在阿爾茨海默症(AD)研究中受到了廣泛關注。為了減少AD病理和認知功能下降,多種飲食方式嘗試了,包括熱量限制(CR),停止高血壓的飲食方法(DASH),生酮飲食(KD),地中海飲食(MedDi)和地中海飲食Dash干預用於神經系統延遲(MIND)飲食。
        堅持MedDi飲食與降低心血管疾病和神經系統疾病(包括AD)和相關的認知能力下降有關。另一種新興的健康飲食方式MIND飲食也與較慢的認知能力下降和AD率顯著降低有關。

參考資料:
Omar SH. Mediterranean and MIND Diets Containing Olive Biophenols Reduces the Prevalence of Alzheimer's Disease. Int J Mol Sci. 2019;20(11):2797. Published 2019 Jun 7. doi:10.3390/ijms20112797


胰島素阻抗是認知障礙風險增加的關鍵


        圖 MetS和AD Aβ/ tau病理可能以前饋機制起作用,以在存在IR時加速AD病理。

        代謝綜合症候群(MetS)是糖尿病發展的主要因素。胰島素阻抗(IR)是目標組織對胰島素正常循環水平反應性下降的狀態,並且是2型糖尿病(T2D),糖耐量異常,肥胖,血脂異常和高血壓的主要特徵;這就是MetS。缺乏運動,肥胖,抽煙,壓力和衰老等遺傳和環境因素都會影響IR的發展。
        阿爾茨海默氏病(AD)是一種進展緩慢的終末神經退行性疾病,可以持續數十年無症狀。它是癡呆症最常見的形式,佔所有病例的70%以上。多項研究表明,MetS與AD風險增加之間存在很強的聯繫。
        具有MetS特徵(例如T2D和肥胖)的個體發生AD的風險更高,而AD患者通常會出現高血糖和IR。胰島素信號傳導受損引起的IR是MetS和AD的共同特徵,可能代表了兩種疾病之間的關鍵聯繫。
        胰島素信號傳導調節tau,而對胰島素信號傳導具有負面影響。因此,功能失調的胰島素信號傳導可增強Aβ和tau病理,而增加的Aβ產生可進一步加重IR。考慮到當前所有年齡段的肥胖病流行和預期壽命的增加,迫切需要了解由IR引起的認知障礙的根本原因,這可能是代謝紊亂患者AD發病率增加的關鍵環節。
        總之,外周MetS誘導大腦中樞IR。導致的胰島素信號傳導受損,主要影響PI3K / Akt途徑,然後增加APP加工/Aβ水平和tau磷酸化。最後,增加的Aβ進一步破壞胰島素信號傳導,加劇AD病理和認知能力下降(圖)。

參考資料:
Kim, B., Feldman, E. Insulin resistance as a key link for the increased risk of cognitive impairment in the metabolic syndrome. Exp Mol Med 47, e149 (2015). https://doi.org/10.1038/emm.2015.3


預防癡呆症12種危險因素生命過程模型

                     圖  癡呆症潛在可改變風險因素的人群歸因分數

        我們對癡呆病因學的理解正在發生變化,預防癡呆症在生命的歷程永遠不會太早也不會太晚。 癡呆症會影響個人,家庭和經濟,全球每年的損失估計約為1萬億美元。日本,韓國,香港和台灣的特定年齡癡呆患病率似乎正在上升。

        2020年《柳葉刀》(Lancet)委員會對預防癡呆症更新的12種危險因素生命過程模型:較少的教育程度,高血壓,聽力障礙,抽煙,肥胖,抑鬱症,缺乏運動,糖尿病,社交缺乏,過量飲酒,腦外傷和空氣污染。這12種可改變的危險因素加在一起,約佔全體癡呆症的40%,理論上可以預防或延遲。

        早期生活(45歲以下)的風險,例如教育程度較低,會影響認知能力;中年(45-65歲)和晚年(65歲以上)的危險因素,影響儲備和觸發神經病理學發展。文化,貧困和不平等是改變認知儲備需求的重要障礙和主要驅動力。那些最被剝奪的人最需要這些改變,並將從中獲取最大的利益。


參考資料:

Livingston G, Huntley J, Sommerlad A, et al. Dementia prevention, intervention, and care: 2020 report of the Lancet Commission. Lancet. 2020;396(10248):413-446. doi:10.1016/S0140-6736(20)30367-6

2020年8月6日 星期四

膳食發炎指數(DII, dietary inflammation index)

    在了解膳食發炎指數(DII, dietary inflammation index)之前,須具備的觀念:

食品風險的高低取決於攝取量吃多少()?吃多久(持續時間)?多常吃(頻率)?

        美國南卡羅來納大學的教授詹姆斯.赫伯特(James R Hébert)與研究團隊發表了研究以美國和歐洲為中心的「膳食發炎指數(dietary inflammation index;DII)」。DII的第一版2009年問世,2013年發表了第二種改進版本,將報告的膳食攝入量(包括DII45個參數)與全球攝入量標準聯繫起來(Hébert等,2019)總共歸納出45種飲食參數對6種發炎生物標誌物的影響,如果這些飲食參數的作用(IL-1βIL-6TNF-αCRP顯著升高,或IL-4IL-10顯著降低)是促發炎的,則它們的得分都為正值(+1),如果其作用是抗發炎,則為負值(-1),如果未發現與該飲食參數相關的生物標記物有顯著變化,則為0,然後經過數據轉換程序。因此,正的DII分數代表促發炎飲食,負的DII分數代表抗發炎飲食。例如,在DII分數的設計和開發中,此分數在不同情況下的取值範圍為7.98−8.87(Shivappa等,2014)這份DII指數發表之後,廣為被各國學者使用,DII指數除了證實與血液中的發炎指標有關,也被用來評估各種慢性疾病的相關性。

膳食發炎指數(DII) 示意圖。
正值為促發炎,負值為抗發炎,沒有顯著變化則為0

表一、DII分數   (適用於成年人)                                      (資料來源: Shivappa等,2014)

主要營養素

個人攝取量

總指數

平均攝取

SD

卡路里(大卡)

2003

0.180

2056

338

蛋白質(公克)

85.34

0.021

79.4

13.9

碳水化合物(公克)

188.30

0.097

272.2

40.0

總纖維(公克)

12.98

-0.663

18.8

4.9

總脂肪(公克)

102.25

0.298

71.4

19.4

飽和脂肪(公克)

32.74

0.373

28.6

8.0

MUFA(公克)

36.64

-0.009

27.0

6.1

PUFA(公克)

24.74

-0.337

13.88

3.76

Omega-3(公克)

2.70

-0.436

1.06

1.06

Omega-6(公克)

24.27

-0.159

10.80

7.50

維生素

個人攝取量

總指數

平均攝取

SD

維生素ARE

245.92

-0.401

983.9

518.6

維生素C(毫克)

34.78

-0.424

118.2

43.46

維生素D(微克)

2.67

-0.446

6.26

2.21

維生素E(毫克)

10.41

-0.419

8.73

1.49

維生素B1(毫克)

1.24

-0.098

1.70

0.66

維生素B2(毫克)

1.45

-0.068

1.70

0.79

維生素B6(毫克)

1.94

-0.365

1.47

0.74

維生素B12(微克)

3.81

0.106

5.15

2.70

菸鹼酸(毫克)

23.12

-0.246

25.9

11.77

葉酸(微克)

213.93

-0.190

273.0

70.7

礦物質

個人攝取量

總指數

平均攝取

SD

鎂(毫克)

194.39

-0.484

310.1

139.4

鋅(毫克)

10.04

-0.313

9.84

2.19

硒(微克)

104.07

-0.191

67.0

25.1

鐵(毫克)

9.28

0.032

13.35

3.71

植化素

個人攝取量

總指數

平均攝取

SD

Flavones(毫克)

0.03

-0.616

1.55

0.07

大豆異黃酮(毫克)

0.18

-0.593

1.20

0.20

β-胡蘿蔔素(微克)

147.22

-0.584

3718

1720

Flavonols(毫克)

3.54

-0.467

17.70

6.79

Flavan-3-ol(毫克)

0.19

-0.415

95.8

85.9

Flavonones(毫克)

0.27

-0.250

11.70

3.82

花青素(毫克)

0.00

-0.131

18.05

21.14

香辛料/香草

個人攝取量

總指數

平均攝取

SD

薑黃(毫克)

0.00

-0.785

533.6

754.3

薑(公克)

0.00

-0.453

59.0

63.2

大蒜(公克)

0.00

-0.412

4.35

2.90

洋蔥(公克)

0.00

-0.301

35.9

18.4

丁香酚(毫克)

0.00

-0.140

0.01

0.08

番紅花(公克)

0.00

-0.140

0.37

1.78

胡椒(公克)

0.00

-0.131

10.00

7.07

百里香/奧勒岡(毫克)

0.00

-0.102

0.33

0.99

迷迭香(毫克)

0.00

-0.013

1.00

15.00

茶飲/飲料/其他

個人攝取量

總指數

平均攝取

SD

綠茶/紅茶(公克)

0.00

-0.536

1.69

1.53

咖啡因(公克)

0.10

-0.110

8.05

6.67

酒精(公克)

0.00

-0.278

13.98

3.72

膽固醇(毫克)

364.25

0.110

279.4

51.2

反式脂肪(公克)

3.69

0.229

3.15

3.75

:

總指數:

總發炎效應分數

平均攝取:

全球平均攝取量(單位/每天)

 

 

SD:               標準偏差


       表二列出了用於模擬三種不同飲食(快餐,地中海飲食和長壽飲食)的典型一日飲食計劃的食物和份量。比較三種飲食的DII得分,選擇了食物和份量的大小,以使三種膳食計劃中的每一項的能量攝入總熱量等於2000 kcal / d快餐飲食具有較高的促炎性DII評分(DII = + 4.07),而長壽飲食DII = -5.54)和地中海飲食DII = -3.96)評分顯示出很強的抗發炎潛力。


表二.快餐,地中海和長壽飲食的建模膳食計劃                 (資料來源:Steck等,2014)

 

早餐

午餐

晚餐

快餐1

DII Score

+4.07

1培根,雞蛋和奶酪餅乾

小咖啡1

1雙層芝士漢堡

1小薯條

1柑橘汽水,不含咖啡因,中等

1香脆雞肉三明治

1小薯條

1柑橘汽水,不含咖啡因,中等

地中海飲食2

DII Score

-3.96

1.5優格

1杯綠色無葡萄

0.5杯去殼核桃

3茶匙蜂蜜

1花草

10.6盎司希臘沙拉(配菠菜,生菜,羊乳酪,番茄黃瓜,橄欖)

1湯匙橄欖油

1湯匙醋

1全麥皮塔餅

0.25杯鷹嘴豆泥

1小杯咖啡

2湯匙牛奶

1杯蒸粗麥粉,煮熟

4盎司羅非魚,煮熟

2湯匙橄欖油

1瓣大蒜

0.5杯茴香

0.5紅辣椒

0.5洋蔥

0.5番茄

0.25杯薄荷葉

0.5杯藍莓

4盎司紅酒

長壽飲食3

DII Score

-5.54

0.75份豆腐香菜和蔬菜:

3.33盎司豆腐,蒸熟,特別緊實

0.26盎司新鮮香菜

0.75納帕白菜四分之一頭

0.75中等胡蘿蔔

0.75

0.75湯匙糙米醋

1杯煮熟的燕麥片

0.5杯黑莓

1杯綠茶

2杯短粒糙米,煮熟

1杯味

1份炒蔬菜:

0.25中等胡蘿蔔

0.125杯煮熟的蓮

0.25中等洋蔥

0.25西蘭花

0.75大白菜

0.5香菇

0.5湯匙麻油

0.5湯匙醬油

0.5湯匙醋

0.5湯匙葛粉

0.25茶匙薑粉

0.5小蔥

0.5杯蘋果汁

1杯綠茶

2杯短粒糙米,煮熟

1杯味

兩份泡菜,南瓜:

0.5杯小豆

0.5杯立方胡桃南瓜

0.25水海藻

0.5湯匙歐芹

0.5份黃瓜和裙帶菜沙拉:

0.5杯醋黃瓜沙拉

0.25杯裙帶菜

0.5湯匙醬油

0.5茶匙糙米醋

1份南瓜布丁:

0.25杯立方胡桃南瓜

0.13盎司海帶

0.5湯匙熟大麥

0.25湯匙芝麻醬

0.25湯匙葛粉

1杯綠茶

1從快餐店菜單中選擇的項目

2希臘復興的食譜:終生烹飪

3久志研究所網站上的食譜


        DII
公式中使用的變量是39種營養素6種食物攝入量數據,這些數據是通過飲食攝入量調查後的營養素分析過程得出的。因此,存在難以直接評估臨床營養領域中的飲食發炎狀態的局限性


    
    除了DII指數(DII)之外,還有其它改良式的指數,適應性飲食發炎指數ADII(adapted dietary inflammatory index)(Brouwer等,2017),經驗性飲食發炎模式評分EDIP (Empirical Dietary Inflammatory Pattern Score)(Tabung2017),經驗性飲食發炎指標e-DII(empirical dietary inflammatory index)(Kanauchi2019),能量調整後的飲食發炎指數E-DII(energy-adjusted DII) (Hébert等,2019)和孩童飲食發炎指標C-DII(children's DII) (Hébert等,2019)等,可以在不同人群之間進行比較,若可以開發一種軟體介面一併呈現設計選項,讓操作者自行來選用或比較,是具有潛力與值得開發的。

 

eDII

與發炎性老化疾病評分有關

        不同於 DII 難以實用的問題, eDII 相對容易使用的評估方法,一般人也有辦法填選;

正分表示飲食比較偏向促進發炎負分表示抗發炎

表三、經驗性飲食發炎指標    e-DII                                    (資料來源: Kanauchi等2019)

促發炎食物選單

+2

+1

0

小計

紅肉,加工肉,內臟

7 /

2-6 /

<2 /

 

勾選

 

 

 

 

其他魚類,雞蛋,加糖飲料,番茄

7 /

5-6 /

<5 /

 

勾選

 

 

 

 

白米飯(精製穀類)

-

3 /

<3 /

 

勾選

 

 

 

 

白麵包/麵條(精製穀類)

-

7 /

<7 /

 

勾選

 

 

 

 

抗發炎食物選單

- 2 

- 1 

小計

綠葉蔬菜

14 /

7-13 /

<7 /

 

勾選

 

 

 

 

深黃色蔬菜

7 /

5-6 /

<5 /

 

勾選

 

 

 

 

果汁,油脂豐富的魚

5 /

2-4 /

<2 /

 

勾選

 

 

 

 

咖啡,茶

2 /

1 /

<1 /

 

勾選

 

 

 

 

紅酒

7-20 /

2-6 /

<2 /, 21 /

 

勾選

 

 

 

 

啤酒或其他酒精飲料

7-13 /

5-6 /

<5 /, 14 /

 

勾選

 

 

 

 

總計

 



參考文獻
:

一、2014飲食發炎指數(dietary inflammatory indexDII)

Shivappa N, Steck SE, Hurley TG, Hussey JR, Hébert JR. Designing and developing a literature-derived, population-based dietary inflammatory index. Public Health Nutr. 2014;17(8):1689-1696. doi:10.1017/S1368980013002115

https://www.ncbi.nlm.nih.gov/pmc/articles/PMC3925198/ 

二、2017適應性飲食發炎指數(adapted dietary inflammatory indexADII)

Brouwer JG, Makama M, van Woudenbergh GJ, Vasen HF, Nagengast FM, Kleibeuker JH, Kampman E, van Duijnhoven FJB. Inflammatory potential of the diet and colorectal tumor risk in persons with Lynch syndrome. Am J Clin Nutr. 2017;106(5):1287–94.

https://academic.oup.com/ajcn/article/106/5/1287/4822318 

三、2017經驗性飲食發炎模式評分(Empirical Dietary Inflammatory Pattern ScoreEDIP)

Tabung FK, Smith-Warner SA, Chavarro JE, et al. An Empirical Dietary Inflammatory Pattern Score Enhances Prediction of Circulating Inflammatory Biomarkers in Adults. J Nutr. 2017;147(8):1567-1577. doi:10.3945/jn.117.248377

https://www.ncbi.nlm.nih.gov/pmc/articles/PMC5525108/

四、2019 經驗性飲食發炎指標(empirical dietary inflammatory indexeDII)

新指數基於8種促炎成分和8種消炎成分。該指數易於使用,不需要詳細估計營養攝入量。

Kanauchi M, Shibata M, Iwamura M. A novel dietary inflammatory index reflecting for inflammatory ageing: Technical note. Ann Med Surg (Lond). 2019;47:44-46. Published 2019 Sep 27. doi:10.1016/j.amsu.2019.09.012

https://www.sciencedirect.com/science/article/pii/S2049080119301311

五、討論了有關DII的濫用和誤解的改進和觀察,並為將來的發展提供了建議。

儘管毫無疑問,飲食是發炎的重要調節劑,但它絕不是唯一的一種。其他指標,包括體育活動壓力,應使用類似的方法得出。如果可以將這些與DII整合在一起,那麼這將開啟營養流行病學和健康促進研究的一個全新時代。

James R Hébert, Nitin Shivappa, Michael D Wirth, James R Hussey, Thomas G Hurley, Perspective: The Dietary Inflammatory Index (DII)—Lessons Learned, Improvements Made, and Future Directions, Advances in Nutrition, Volume 10, Issue 2, March 2019, Pages 185–195, https://doi.org/10.1093/advances/nmy071

https://academic.oup.com/advances/article-abstract/10/2/185/5274474?redirectedFrom=fulltext

六、由於上面文獻五Hébert發表的文章質疑適應DIIADII的使用,作者做出的回應

van Duijnhoven FJB, Brouwer JGM, van Woudenbergh GJ, Kampman E, Feskens EJM. Comment on "Perspective: The Dietary Inflammatory Index (DII)-Lessons Learned, Improvements Made, and Future Directions". Adv Nutr. 2020;11(1):177-178. doi:10.1093/advances/nmz087

https://www.ncbi.nlm.nih.gov/pmc/articles/PMC6964988/